«Оценка контаминации поверхностей в свиноводческих хозяйствах вирусом репродуктивно-респираторного синдрома свиней (РРСС) методом ОТ-ПЦР в реальном времени с детекцией жизнеспособности вируса».
Репродуктивно-респираторный синдром свиней (РРСС) остается одной из наиболее значимых угроз для глобального свиноводства. Персонал, перемещающийся между производственными объектами без соблюдения мер биобезопасности, может выступать в качестве механического переносчика, способствуя распространению возбудителя. Обнаружение генетического материала вирусов на поверхностях в свиноводческих помещениях методами ПЦР и ОТ-ПЦР является технически возможным, однако сведения о жизнеспособности выявляемых вирусных частиц крайне ограничены.
С целью оценки биологического риска, связанного с контаминацией объектов окружающей среды жизнеспособным вирусом РРСС, было проведено исследование на десяти серопозитивных фермах периода доращивания в США. На каждом предприятии отобрано по 20 проб с поверхностей и по 8 проб оральных жидкостей. Поверхностные образцы анализировали с использованием стандартной ОТ-ПЦР в реальном времени (ОТ-ПЦР-РВ) и метода ОТ-ПЦР-РВ с оценкой жизнеспособности (v-PCR), а оральные жидкости — с применением коммерческого набора VetMAX™.
Результаты показали, что геномная РНК вируса часто детектировалась на металлических и пластиковых (непористых) поверхностях (80 положительных проб из 200). Жизнеспособный вирус выявлен в 48 образцах на шести фермах, причем на непористых материалах — с более высокой частотой. Полученные данные свидетельствуют о наличии жизнеспособного вируса на поверхностях, регулярно контактирующих с персоналом, что указывает на потенциальную возможность непрямой передачи через контаминированные объекты, особенно в зонах с высокой проходимостью. Вместе с тем, прямая связь между загрязнением поверхностей и передачей инфекции не установлена; статистически значимой ассоциации с результатами анализа оральных жидкостей не обнаружено, что определяет необходимость дальнейших исследований.
Применение метода v-PCR в комбинации с целенаправленным отбором проб позволяет детектировать интактные вирусные частицы, что представляет практическую ценность для ветеринарных специалистов и персонала ферм, курирующих поголовье на этапе доращивания. Данный подход может быть использован для повышения осведомленности о рисках, совершенствования протоколов биобезопасности и снижения вероятности непрямой передачи РРСС в системах свиноводства.
Для справки: «Viability RT-qPCR — метод, который сочетает обработку образца моноазидом пропидия (PMA) или подобными красителями, проникающими только через поврежденные мембраны (т.е. в нежизнеспособные), с последующей ПЦР-РВ. Это позволяет амплифицировать только нуклеиновые кислоты из интактных, потенциально инфекционных вирусных частиц, исключая сигнал от разрушенных или нежизнеспособных.
